实验介绍

细胞粘附实验通常分为两类，即细胞与细胞粘附和细胞与基质粘附。机体内许多细胞，如上皮细胞固定在某处发挥功能；另一些细胞，如白细胞，活跃运动，就需要不断调节细胞粘附。细胞粘附性的改变在肿瘤转移过程中也发挥着重要作用。恶性肿瘤具有从原发瘤分离及在体内扩散的能力，提示这些细胞相互识别及粘附机制发生了改变。用到测定细胞粘附性的实验有：机械法测定细胞粘附性，发射性核素法测定细胞粘附性，细胞分离实验和肿瘤细胞聚集体形成实验。

实验方法

试剂：FN纤连蛋白，BSA试剂，96孔板，MTT或CCK-8试剂

1.用10ug/ml的FN预铺96孔板，70 uL/孔，4℃过夜后，PBS洗3遍，再用1% BSA于37℃封闭1 h，PBS洗3遍

2.待测细胞培养至对数生长期，消化细胞，用无血清培养基悬浮细胞，用血球计数板计数，调整浓度为5*105/mL分别接种于预铺FN的96孔板中，每孔5000个细胞，每组设3个复孔。37 ℃孵育1 h后，PBS洗去未黏附的细胞。

检测方法：

方法1：3.5%戊二醛于4 ℃固定0.5 h，PBS 洗3遍；0.1%的结晶紫染色，室温静止0.5 h，PBS洗3 遍，每孔加入100 μL 10%的乙酸，5~10 min后用酶标仪检测595 nm的吸光度值，用以表示黏附细胞的多少。

方法2：按照每孔加入100 uL甲醇，固定15min每孔加入100 uL吉姆萨染液，染色15 min，PBS洗去染液倒置显微镜下随机取5个随机视野计数粘附细胞数量病拍照，统计结果。

方法3：MTT法或CCK-8检测细胞量。

客户需要提供

1 客户提供实验分组情况及实验背景资料，有具体要求请事先说明；

2 细胞株（也可以由我们代购）、干预因素原料；

3 干预药物及浓度；