一、原理

活细胞表面保留有较完整的抗原或受体，先用特异性鼠源性单克隆抗体与细胞表面相应抗原结合，再用荧光标记的第二抗体结合，根据所测定的荧光强度和阳性百分率即可知相应抗原的密度和分布。

二、操作步骤

三、试剂和器材

1.各种特异性单克隆抗体；

2.荧光标记的羊抗鼠或兔抗鼠第二抗体，灭活正常兔血清；

3.10％FCSRPMI1640,DPBS、洗涤液、固定液；

4.玻璃管、塑料管、离心机、荧光显微镜等。

四、注意事项

1.整个操作在4℃下进行，洗涤液中加有比常规防腐剂量高10倍的NaN3，上述实验条件是防止一抗结合细胞膜抗原后发生交联、脱落。

2.洗涤要充分，红外碳硫仪以避免游离抗体封闭二抗与细胞膜上一抗相结合，出现假阴性。

3.加适量正常兔血清可封闭某些细胞表面免疫球蛋白Fc受体，降低和防止非特异性染色。

4.细胞活性要好，否则易发生非特异性荧光染色。

五、客户提供

细胞或细胞刺激描述

六、结果提供

实验图谱及分析结果

七、服务周期

10-15工作日